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小布Tips | 膜片钳技术的应用及研究案例解析

2024-08-29 来源:步旅网

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解决方案1:

膜片钳技术是细胞生物学研究中的一种精密方法,旨在记录通过离子通道的电流,以揭示细胞膜上单一或多个离子通道分子的活动。整个系统由放大器、电极拉制仪、显微镜、显微操作仪、防震台、显示器和数模转换器等组成,能够通过负压吸引使尖端与细胞膜形成高阻封接,进而实现对膜片上离子通道电流的监测与记录。
膜片钳技术的应用广泛,涵盖单离子通道功能研究、心肌细胞离子通道研究、离子通道作用机制研究、单细胞形态与功能关系研究、心血管药理学研究、脑片膜片钳研究、神经环路研究以及神经突触可塑性研究等众多领域。在脑科学中,脑片膜片钳技术尤为突出,它能够检测并记录离体脑片中细胞间的离子通道活动,提供接近生理状态的电生理信号,为研究神经系统中单个细胞或不同区域之间的相互作用关系提供重要信息。
基于脑片膜片钳技术的细胞电生理研究案例包括细胞兴奋性研究、细胞兴奋性及抑制性突触后电流研究以及突触可塑性研究。这些研究常涉及记录神经元动作电位发放、检测微小兴奋性及抑制性突触后电流、以及全细胞模式记录长时程增强和长时程抑制等指标,旨在观察细胞整体兴奋性、突触传递、神经元兴奋性和节律性等。
具体案例中,CPN和PV+cal神经元形成的跨胼胝体抑制环,通过光遗传激活PV+cal神经元,可以显著诱导同侧CPN神经元的IPSC信号强度。NTS投射到PVT脑区神经元的全细胞记录则揭示了NTS EGFP+神经元的sEPSC频率、动作电位频率以及静息膜电位等信息。此外,星形胶质细胞Ca2+信号通路的抑制导致了恐惧记忆的形成和TA-CA1突触可塑性的损害,进一步体现了膜片钳技术在神经科学领域的应用价值。
膜片钳技术已发展成为现代细胞电生理的常规方法,不仅支持基础生物医学研究,也为临床医学研究提供了重要工具。布林凯斯等机构提供包括在体电生理记录、离体电生理电流钳、电压钳记录等在内的服务,同时还能进行脑电图(EEG)、肌电图(EMG)和心电图(ECG)等记录,全面满足细胞电生理研究的需求。

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