女性人乳头瘤病毒感染基因类型分析

摘要】目的 了解本地区体检女性人群生殖道HPV感染率、多重感染和亚型分布情况，为预防HPV感染和宫颈癌提供依据。方法 采用PCR体外扩增和DNA反向点杂交相结合的基因芯片技术进行HPV基因分型。结果 1321例21-66岁的健康检查者中，共检出阳性患者162例，阳性率为12.3%，其中高危型占68.7% ，低危型占31.3%，检出前五位的亚型分别为HPV16 (14.7%)、58（10.8%）、

52(10.4%)、11(10.0 %)、6 (9.7%)，未检出MM4、44、73、83型。HPV阳性者中多重感染率为40.2%，以二重感染常见（25.3%），不同年龄段人群HPV阳性率有差异，21-30岁人群阳性率最高为20.1%。结论 本地区HPV感染主要见于21-30岁妇女，主要为单一基因型、高危型感染、常见亚型为16 、58、5 、11、 6型。 【关键词】人乳头瘤病毒 基因芯片检测 基因分型

【中图分类号】R730.2 【文献标识码】A 【文章编号】2095-1752（2013）19-0123-02

人乳头状瘤病毒是一种双链嗜上皮无包膜的小DNA病毒，属乳多空病毒科，在人和动物中分布广泛。目前发现HPV有100多个基因型，约40个型别涉及到生殖道感染[1]。宫颈癌病因学研究表明，高危型HPV与宫颈癌及宫颈上皮内高度病变（CIN2/3）的发生密切相关，从发病机制来说宫颈癌是一种性传播疾病，有相当一部分为亚临床感染。通过阻断HPV的传播可以预防宫颈癌的发生，关键是筛查和早期控制HPV感染。目前预防性疫苗主要针对高危型HPV-16HPV-18.其研发的数据是基于欧美国家的HPV流行病学资料。然而地区不同，HPV的人群感染率不同，优势型别也不同。并且现有的疫苗对其它型别的交叉预防能力有限，因此特定地区的HPV流行病学资料的获得很有必要。HPV基因芯片技术一次可检测23种常见HPV基因型，检测通量大，结果准确。是HPV 基因分型和调查其分子流行病学特征的理想方法[2]。 1 资料与方法

1.1一般资料：2010年3月1日至2012年10月31日，到本中心健康体检的1321例妇女。年龄21-66岁，平均年龄38岁。

1.2仪器与试剂： HPV分型基因芯片检测系统（亚能生物技术有限公司，深圳）。试剂选用深圳亚能生物技术有限公司生产的HPV基因分型检测试剂盒。可检测23种HPV基因型别，包括18种高危型：HPV16、18、30、33、35、39、45、51、52、53、56、58、59、66、68、73、82、83；5种低危型HPV6、11、42、43、81。

1.3样本采集：采样前先用面拭子将宫颈口过多的分泌物轻轻擦拭干净，后用宫颈刷置于宫颈口轻轻旋转4-5圈，取出宫颈刷置于保存液中密闭送检，或置-20℃保存待测。

1.4检测方法： 通过HPV DNA的提取、扩增、杂交、洗膜、显色、结果判读、保存及打印，对所有检测数据进行统计学处理。 2 结果

2.1感染率和型别分布 所采集的1321例标本中检出HPV阳性162例，阳性率12.3%，23种亚型被检出19种，MM4、73、83、44未检出。高危型检出率占68.7%，低危型检出率占31.3%，对多重感染者，各亚型的阳性率重复计算，亚型检出率见表1。

表1 HPV感染亚型分布表

3 讨论

宫颈癌是世界上妇女第二位最容易发生的癌症，每年新增约50万例，每年因宫颈癌死亡人数达27万，我国每年新发病例约13万，占世界新发病例总数的26%。且近年来呈现地区增长及发病年轻化趋势[3]。严重影响着妇女的生活和健康。现有研究表明，HPV致癌机制可能是：在机体免疫力低下时HPV整合到机体的核染色体基因组上，致使抑癌基因p53失活，进而引起细胞增殖调节失控。宫颈癌的发生过程可归结为：持续性高危型HPV感染，宫颈上皮不典型增生，宫颈原位癌，宫颈癌，这一过程大概需十年左右。因此，早期发现HPV感染尤其是高危型感染，并进行积极有效的治疗，将会大大降低宫颈癌发生率。国外HPV感染以HPV1618为主，而我国在HPV型别及感染率与国外有较大差异，且国内不同地域之间亦有差异。周明君[4]对许昌地区HPV感染别型分析，阳性率为18.8%；常见亚型为HPV16、58、52、11、6。王颖等[5]对福建地区健康体检人群HPV调查,HPV感染率为11.3%，感染前五位的型别为HPV52、58、16、18、68；娄咏崴等[6]对吉林、黑龙江地区HPV感染状况分析，阳性率是39.9%，高危亚型以HPV16、58、52为主，低危型以HPV6、11为主。本研究发现，占检出前五位的是HPV16（14.7%）、HPV58(10.8%)、HPV52(10.4)HPV11（10.0%）\\HPV6(9.7%),跟据上述研究，HPV16感染率最高，其次58型国内感染率较高，其他型别的HPV感染率存在较大地区差异，其中HPV18和45型在国内报道中感染率较低，而其分别在欧美和非洲西部较常见。证明HPV感染的基因型存在明显的人群和地域差异。本研究阳性率较周明君[4]，娄咏崴等[6]报道的阳性率偏低，和王颖等[5]报道相近，这可能和受检人群来源不同有关。

本研究发现单一型感染占HPV感染者的59.8%，多重感染占40.2%,说明本地区多重感染占相当大的比例,有报道称HPV多重感染对宫颈病变的发展有促进作用[7]，这需要我们提高警惕做好多重感染者的防治工作。

本组资料女性HPV感染高峰年龄为21-30岁，有研究表明HPV感染高峰期为18-30岁，随年龄的增加，感染的风险逐渐降低[8]。这和本研究结果较为符合，其原因可能与年青妇女性生活频繁有关。

目前HPV疫苗用于预防和治疗HPV感染已成为研究的热点。但现有的疫苗具有“型特异性”，仅对HPV16、18、6、11亚型感染有效。而不同HPV亚型对不同种族人群致癌性的强弱也明显不同。了解分析本地区HPV流行的主要型别，不仅对HPV感染亚型的检测更有针对性，而且可对本地区HPV感染的防治及疫苗研发提供重要依据。

参考文献

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[3]万磊，万建平，张燕玲，等.子宫颈癌年轻化趋势的临床分析[J].中国肿瘤临床，2004,31（10）:548.

[4]周明君.许昌地区妇女宫颈人乳头瘤病毒感染型别分布特征分析[J].中国优生与遗传杂志，2012,20(5):124-125.

[5]王颖，黄毅，陈渝.福建地区人乳头瘤状病毒流行病学调查研究[J].检验医学与临床，2012,9（24）:3099-3101.

[6]娄咏崴，谷振环.吉林地区、黑龙江地区人乳头瘤病毒感染状况分析[J].中国实验诊断学，2012,16（12）:2279-2280.

[7]Lee SA,Kang ,D Seo SS，et al.Mutipl HPV infection in cervical cancer screened by HPV DNA Chip[J].cancer Lett,2003,198(2):187-192.

[8]温贵华，刘晋洪，黄玲，等.深圳市HIV阳性人群HPV病毒载量分析[J].中国公共卫生，2009，25（7）:795-796.