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WPUPVA水凝胶载菌与释放抑菌的研究

2022-04-27 来源:步旅网
第38卷暋第2期暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋陕西科技大学学报暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋Vol.38No.2

ournalofShaanxiUniversitfScience&Technolo暋2020年4月暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋暋J暋暋暋暋暋暋暋Ar.2020yogyp

*

)暋文章编号:2096灢398X(202002灢0109灢07

/WPUPVA水凝胶载菌与释放抑菌的研究

(陕西科技大学化学与化工学院,陕西西安暋7陕西科技大学环境科学与工程学院,陕西西安1.10021;2.)暋710021

朱孟臻1,张暋敏2*,黄学芳1

以IR、Zeta电位、TG、XRD、SEM、UV等分析测试方法研究了载菌前后水凝胶的性能变化,

并使用抑菌圈法验证了其抗菌Lanmuir和Freundlich模型对水凝胶的释放行为进行了分析,g效果.研究结果表明:水凝胶与菌体之间存在着氢键与静电力的相互作用,载菌后水凝胶热稳/定性提高,但不影响水凝胶结晶性能;WP载UPVA体积比例为1暶2的水凝胶载菌量最大,

9

//;菌量达到1.对应水凝胶的比表面积为0.实验条件下菌种能够39暳10cfumL,4212m2g快速释放,且释放过程符合伪一阶动力学模型,属于物理脱附;而脱附后的嗜酸乳杆菌仍能达到对大肠杆菌的抑制作用.

关键词:水凝胶;载菌;相互作用;释放;抗菌中图分类号:TB324暋暋暋暋文献标志码:A

/聚乙烯醇(摘暋要:制备出了负载嗜酸乳杆菌(的聚氨酯(水凝胶.采用FRG)WPU)PVA)T灢

Studnbacterialloadandreleasetoantibacterialyo

/ofWPUPVAhdroelyg

(,S,X1.ColleeofChemistrndChemicalEnineerinhaanxiUniversitfScience&Technoloi曚angyaggyogy

12*1

,,HUANGXZHUMenzhenZHANGMinuefangg灢灢

;,710021,China2.SchoolofEnvironmentalScienceandEnineerinShaanxiUniversitfScience&Techggyo灢,)noloXi曚an710021,Chinagy

lusacidohilus(RG)waspreared.Theproertieschaneofbacterialoadedhdroelstudppgygp灢灢,iedbeansofFT灢IR,ZetapotentialSEM,TG,XRD,UVandsoon.TheLanmuirandymg

:/AbstractApolurethane(WPU)olvinlalcohol(PVA)hdroelloadedwithLactobacil灢ypyyyg

,stabilitfthehdroelwasimrovedafterthebacteriawasloadedbutdidn曚taffectthehyoygpy灢

/droelcrstallizationproert.WhenthevolumeratioofWPUPVAis1暶2,thehdroelgypyyg

9

,/hadthemaximumloadedamountandtheloadedamountreached1.39暳10cfumL,andthe

effectwasverifiedbheinhibitionzonemethod.Theresultsshowedthattherewerehdroyty灢

,enbondinteractionandelectrostaticforcebetweenthehdroelandbacteriathethermalgyg

Freundlichmodelswereusedtoanalzethehdroelreleasebehavior.Theantibacterialyyg

*收稿日期:2019灢10灢24

)基金项目:陕西省科技厅重点研发计划项目(2018SF灢375

,作者简介:朱孟臻(男,山西永济人,在读硕士研究生,研究方向:功能材料1994-)

,通讯作者:张暋敏(女,甘肃兰州人,教授,博士,研究方向:可降解材料及环境污染评价,1963-)zhanlaoshi00@163.comg

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陕西科技大学学报

第38卷

/secificsurfaceareaofthecorresondinelwas0.4212m2.Thebacteriacouldbereppggg灢

,leasedraidlndertheexerimentalconditionsandthereleaseprocessaccordedwiththepyup

cillusacidohiluscouldstillinhibitE.coli.p:;;;;Keordshdroelloadbacteriainteractionreleaseantibacterialygyw0暋引言

细菌感染问题一直制约着人们生活水平的提高,为了抑制细菌的产生和滋长,进而防止疾病的传播,使用具有抗菌性能的材料是最为简单有效的

1]2]

方法[近年来,新型的水凝胶抗菌材料[受到了.

,seudofirstorderkineticmodelwhichbelonstophsicaldesortion.ThereleasedLactoba灢pgyp灢

西安德朗生物科技有限公司.RG,

,国药集团化学试剂有限公司;嗜酸乳杆菌AR)

米人占化工有限公司;聚乙烯醇PVA(1799H

(氯化钠NLB培养基:aCl10gAR天津市天力

,东莞水性聚氨酯溶液WPU(MR灢707Tech)

研究者们的关注.水凝胶的三维网状结构以及丰富

3]官能团[所表现出来的药物负载与可控释放的性4]能[使其成为了优异的抗菌材料的载体.除了壳聚]5

,糖及其衍生物水凝胶具有良好抗菌效果外[大都

,,,(化学试剂)酵母膏1蛋白胨5g琼脂粉10g5gBRH调至7.0~7.2.p

1.1.2暋主要仪器

,北京奥博星生物技术有限公司)蒸馏水1000mL,

采用水凝胶基材负载抗菌剂的方式达到抗菌的目

]]67

、、的.常用的银系抗菌剂[光触媒类抗菌剂[纳米]8

粒子抗菌剂[等抗菌能力已经得到验证,但仍有价

美国Bruker公司;FEIQ45型扫描电子显微镜,FEI公司;ZetasizerNanoZS型纳米粒度表面电位分析仪,Malvern公司;TGA灢Q500型热重分析/仪,美国T射线衍射A仪器公司;DMax3c型X灢灢仪,日本Rialcu公司;UV灢2600型紫外可见分光g型比表面积仪,美国麦克仪器公司;SW灢CJ灢1FD型光度计,尤尼克(上海)仪器有限公司;ASAP2460超净工作台,苏州净化设备有限公司;SPX灢250BS灢

德国VECTOR灢22型傅里叶变换红外光谱仪,

格昂贵,不易回收,以及环境危害等问题亟待解决.

嗜酸乳杆菌作为益生菌,来源广泛且可再生,其在发酵过程中除产生乳酸、乙酸和双乙酰外,还

9]

,能产生细菌素类抑菌物质[所以嗜酸乳杆菌具有

作为抗菌剂的潜力.它目前最广泛的应用是作为饲料添加剂来拮抗致病肠道菌,改善牲畜的肠道微环

]10,11

境以提高产量[.

上海新苗医疗器械制造公司;II型生物培养箱,

上海申安医疗器械LDZX灢30FBS型高压灭菌锅,厂;北京松源华兴科技发展LGJ灢10型冷冻干燥机,有限公司.

关于水凝胶负载菌种的研究,大部分是采用包

12]

,埋的方式达到菌种固定和保存的目的[张敏]13

/等[利用酵母菌发泡制备PVALCMC水凝胶以14]

实现对染料的吸附与降解;张永栋等[采用PVA

/1.2暋WPUPVA水凝胶的制备

水凝胶包埋菌种,与植物联合除氮;另外壳聚糖,海藻酸钠水凝胶也常用于包埋酵母菌等菌种用于发

15,16]酵工业[.

泡1然后在92h使其溶胀,0曟下水浴加热溶解,/,搅拌速度1溶解时间2h,得澄清透明溶00rmin液,静置消泡过夜,使P得到VA分子链充分舒展,/得到WP将上述所得到的混合UPVA混合溶液;溶液倒入二十四孔板中,置于低温冰箱循环冷冻解/冻3次,用去离子水洗净,得到WPUPVA水凝/1.3暋RG灢WPUPVA水凝胶的制备胶.

,称取絮状P量取蒸馏水3浸VA40g60mL,

本研究选取嗜酸乳杆菌作为抗菌剂,采用聚氨

]17灢20

,酯/聚乙烯醇水凝胶作为抗菌剂载体[制备出

质量分数为1将WP0%的PVA水溶液;U与PVA

/了抗菌水凝胶R研究了载菌前后材G灢WPUPVA.料性能变化,材料配比对水凝胶载菌量的影响以及菌种释放行为.此外,还初步验证了负载嗜酸乳杆菌后的抗菌水凝胶的抗菌性.1暋实验部分

1.1暋主要材料和仪器

/,在6搅拌速度2搅拌1.0曟下共混,00rmin5h,

选并纯化富集,并在其生长稳定期初始阶段将上述/制备的湿态WPUPVA水凝胶加入RG菌菌液中

/将RRG灢WPUPVA水凝胶:G菌从原料中筛

1.1.1暋主要原料及试剂

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浸泡负载1负载过程仍需震荡培养,防止形成2h,/PVA水凝胶.RG灢WPUPVA水凝胶的制备过程示意图如图1所示.

/菌膜影响后期负载量的计算.最终得到RG灢WPU

/燥后WP富集培养的RUPVA水凝胶粉末、G菌

/菌粉、冷冻干燥RG灢WPUPVA水凝胶粉末等分散于不同p测定Z其结果如H的溶液中,eta电位,/其零点电位发生变化为WPUPVA凝胶上后,

/由此可知,2.70.RG菌负载WPUPVA水凝胶的/图3所示.由图3可知,WPUPVA的零点电位小

于1,RG菌株的零点电位为4,RG菌负载在

图1暋RG菌负载水凝胶的制备过程示意图2暋结果与讨论2.1暋FT灢IR分析

过程中存有静电力的作用,这验证了章节2.1中的论断.

/图2为PVA、WPU、RG菌、WPUPVA水凝

/胶、从图2可以RG灢WPUPVA水凝胶的FT灢IR图.

/看出,WPUPVA的-OH吸收峰发生偏移,WPU在1645cm-1处的羧基吸收峰偏移至1690cm-1

处,表明PVA与WPU之间发生了氢键交联;RG菌

-1

的3600cm处为菌种中游离-OH的吸收峰,RG灢

/WPUPVA的-OH吸收峰偏移到3433cm-1处,这是因为菌体与材料之间有了氢键所导致的峰位偏移,所以RG菌负载在水凝胶表面的过程中存有氢键的作用;2945~2870cm-1为基材以及RG菌和

]21

其产物乳酸、胞外多糖[中的C-H的伸缩振动

//图3暋RG菌、WPUPVA水凝胶、RG灢WPUPVA2.3暋SEM形貌观察

水凝胶的Zeta电位图

水凝胶冷冻干燥后的S由图4可以看EM照片./出,孔径大WPUPVA的干燥凝胶属于大孔材料(,/于5孔洞形态0nm)WPUPVA体积比例不同,()、()也有差异.其中,图4所示三维结构呈现出bc显示随着P凝胶孔洞变小,结构VA含量的增加,泡载菌后,通过电镜观察可以看到,水凝胶孔壁周)),围有大量R图(且水凝G菌均匀附着其表面(f胶的孔洞结构仍然能够保持.

//图4为WPUPVA水凝胶和RG灢WPUPVA

峰,使1645cm-1处有菌体酰胺栻带面内变形振动,

]22峰形与峰位发生了变化[这一变化可能是由于菌.

体表面蛋白的氨基与基体中WPU的羧基发生相互作用.因为两个基团的电荷性质不同,所以菌体与材料之间可能还存有静电力的作用.

()()、()较好的形态;图4孔径大且不均匀;图4ade/发生了坍塌;将WPUPVA比例为1暶2的凝胶浸

)/)/暋(aWPUPVA1暶1暋暋(bWPUPVA1暶1.5

2.2暋载菌水凝胶的负载机制

/图2暋PVA、WPU、RG菌、WPUPVA水凝胶、

/RG灢WPUPVA水凝胶的红外光谱图可Zeta电位是带电颗粒表面剪切层的电位,

用于描述胶体颗粒之间的静电相互作用.将冷冻干

)/)/暋(cWPUPVA1暶2暋暋(dWPUPVA1暶2.5

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陕西科技大学学报

第38卷

个阶段的分解.第一阶段在250曟~370曟之间,为WP第二阶段U的主链以及PVA侧链的分解;

在3主要为WP70曟~470曟之间,U软段和PVA

()/)载菌凝胶暋暋eWPUPVA1暶3暋暋暋(f

()/在图6中,aWPUPVA凝胶干燥样品有两

主链的分解.在失重5%时,部分样品的失重温度小于1这是由于干燥后的多孔三维结构样品00曟,极易吸收水分,该部分质量损失是由样品中的水分

图4暋不同体积比例凝胶基体与载菌凝胶的电镜照片

)/挥发造成的.联合图6(与表1可知,aWPUPVA265曟之间.

在图6(中,基材与载菌凝胶选取的是b)水凝胶干燥样品的最大热分解温度均在250曟~

2.4暋BET测试

表面积的测试结果如图5所示.本研究所制得的水/比表面积先增大后减小.PVA含量的增加,WPU

2

/的干燥水凝胶比表面积最小,为0.0742m.g2/,凝胶的比表面积整体偏小,小于0随着.5mg

/不同体积比例的WPUPVA干燥水凝胶的比

/质量损失数WPUPVA体积比为1暶2的水凝胶.

()据见表2所示.由图6可知,与原料WPbU、PVA主要是WPU与PVA之间分子间氢键作用的结

/果;RG灢WPUPVA凝胶材料初始阶段的质量损

PVA体积比例为1暶2的干燥水凝胶比表面积最

2/;/大,达到了0.4212mWPUPVA体积比为1暶3g/可以看出,WPUPVA体积比例为1暶1的干燥水凝胶孔洞很大,而且三维网状结构不均匀,导致表/面积小;WPUPVA体积比例为1暶2的干燥水凝

/胶孔洞均匀,三维网状结构规律密实;WPUPVA体积比为1暶3的干燥水凝胶的孔洞形态的形成是由于水凝胶中P从而使形成的微VA含量的增加,晶区以及交联点的数目增加,物理交联点之间的距

]23

,离下降,网孔数量减少[交联程度增加,空间结

/相比较,WPUPVA基体的热分解温度明显提高,/失为R在RG菌中结合水的损失;G菌与WPU

载PVA基体之间的静电与氢键作用力的影响下,菌凝胶的分解温度提升约20曟.

对照不同体积比例干燥水凝胶的SEM照片

构收缩坍塌,导致比表面积减小.

()/不同体积比WPaUPVA水凝胶的热重曲线

/图5暋不同体积比例WPUPVA

水凝胶的比表面积

2.5暋热性能分析

()/图6为不同体积比例WPaUPVA水凝胶

()/的热重曲线图;图6为PbVA、WPU、WPUPVA/水凝胶、RG灢WPUPVA水凝胶的热重曲线图.

()/bPVA、WPU、WPUPVA水凝胶、/RG灢WPUPVA水凝胶的热重曲线.

图6暋水凝胶热重曲线

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/朱孟臻等:WPUPVA水凝胶载菌与释放抑菌的研究

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/表1暋不同体积比例WPUPVA凝胶基体

的热分解温度

项目T5%/曟d灢

T10%/曟d灢T50%/曟d灢Tmax/曟d灢

1暶1216253310593

1暶1.5190248374593

/WPUPVA体积比

1暶222132758889

1暶2.523338958791

1暶3139235333455

照图8所示的R计算出负载前后的G菌标准曲线,菌液浓度,根据负载前后的浓度差值,即可计算出水凝胶负载的菌量,具体数值如表3所示.

//表2暋WPUPVA水凝胶和RG灢WPUPVA

水凝胶的热分解温度

项目

WPU151244351524

T10%/曟d灢T50%/曟d灢Tmax/曟d灢

T5%/曟d灢

///PVAWPUPVAWPUPVARG226233264585

22132758889

24537758766

2.6暋结晶性能分析

/图7为RG菌负载前后的WPUPVA水凝胶

/以及原料的X由图7可知,RD谱图.WPUPVA凝胶基体在2处呈现衍射峰,与WP毴=19.8曘U相比较峰型变窄,这是由于PVA与WPU形成了较为规整的分子间氢键,提高了其结晶性能;RG菌、、在2处分别呈现毴=19.7曘2毴=31.8曘2毴=45.3曘//与WPUPVA基体相比较,RG灢WPUPVA水凝

、、胶分别在2处分毴=19.4曘2毴=31.5曘2毴=45.5曘别呈现衍射峰,峰型没有太大变化,说明RG菌成衍射峰,且峰型较宽泛,说明RG菌结晶性能很低;

/表3暋不同体积比例WPUPVA水凝胶载菌量

1暶1

/载菌凝胶(WPUPVA比例)1暶1.50.7470.3601.1100.333

0.9380.4851.3900.4211暶2

1暶2.50.7760.3851.1300.114

1暶3

图8暋嗜酸乳杆菌标准曲线

对照组Abs负载后Abs

0.7350.380

0.7580.4000.9800.074

2.8暋载菌水凝胶的释放与动力学研究

比表面积越大,暋暋对应比表面积数据可以看出,

微生物的可附着面积也越大,进而负载量也增大.

为了研究水凝胶载菌后的释放情况,选取载菌

2(/)0.比表面积/101mg

9()0.载菌量/96010cfu

功的负载到凝胶上且基本不影响水凝胶的结晶性.

/量最佳的WPUPVA体积比例为1暶2的载菌凝muir和Freundlich模型对微生物释放量进行伪一阶和伪二阶数据分析.伪一阶和伪二阶动力学模型)、()分别如公式(所示:12

胶在缓冲溶液中研究其释放行为.分别利用Lang灢

qt暋暋暋暋暋暋ln=nlnt+lnk1

eq暋暋暋暋暋暋

t11()2=2+tkteqq2eq)、()中:暋暋式(12e为微生物释放平衡时的释放q//图7暋RG灢WPUPVA水凝胶、WPUPVA

凝胶基体及原料的XRD谱图

2.7暋水凝胶载菌量

Lanmuir和Freundlich模型中微生物释放速率常g数.

)所示的R暋暋由图9(aG菌释放动力学曲线可

知,载菌水凝胶能在40min内快速达到释放平衡;

2

()由图9可知,拟合伪一阶动力学线性相关性Rb

()1

量;kkt为t时刻是微生物的释放量;1、2分别为q菌液,分为两组,一组对照,一组加入制备的水凝胶,浸泡负载1分别测量空白组以及对2h后取出,应负载组在紫外吸收6对00nm波长下的吸光度.

实验中选取同批次培养至生长稳定期的RG

大于0.说明R96,G菌在释放过程符合伪一阶动力学方程,该过程为物理脱附过程;拟合伪二阶动

2

力学线性相关性R在为0.说明该过程不符005,

合二阶动力学方程,没有化学作用参与脱附过程.

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陕西科技大学学报

第38卷

()aRG菌释放曲线

/图10暋RG灢WPUPVA水凝胶的抑菌圈实验3暋结论

本研究制备出了以静电力与氢键附着嗜酸乳杆菌的新型水凝胶.研究结果显示,菌与凝胶之间的作用力提高了水凝胶的热稳定性;比表面积越大,载菌量越大;菌种释放过程符合伪一阶动力学/模型,属于物理脱附;RG灢WPUPVA水凝胶能释

放R并对大肠杆菌的生长起抑制作用.G菌,参考文献

()伪一阶动力学方程曲线b

[]1PeddintiBST,ScholleF,VarasMG,etal.Inherentlgy

,resistantmicrobesinminutes[J].MaterialsHorizons[]2IkedaM,TanidaT,YoshiiT,etal.Installinloicatereggg灢灢

],lecularhdroelenzmehbrids[J.NatureChemistrygyyy灢[]3ZhanBellinerAndrewM,GlettieanL,etal.AgSY,ggD

():2014,66511灢518.

sonsestoavarietfbioloicalsubstancesinsuramopyogp灢():2019,6102056灢2062.

selfsterilizinharedmultiblockpolmersthatkilldrugcgyg灢灢

[],lastomerforuseingastricdevicesJ.NatureMaterials

()伪二阶动力学方程曲线c

[],,4ZhanLiuJXiaoJetal.K+灢reconitioncasulesgLL,gp

,():nications2011,474512283灢12285.

[]withsuirtineleasemechanismsJ.ChemicalCommuqgr灢():2015,14101065灢1071.

H灢resonsivesuramolecularolmerelasanentericeppppyg灢

2.9暋载菌凝胶的抗菌试验

图9暋RG菌释放曲线

[]5ChanFriasJrRR,AlvarezLV,etal.ComaragAKT,p灢

tiveantibacterialactivitfcommercialchitosanandchiyo灢]tosanextractedfromAuriculariasJ.Biocatalsisandp[y[]刘暋鑫,任暋艳,周子军,等.纳米银抗菌机理及应用研究6

[]A7ltanM,YildirimH.Mechanicalandantibacterialroerpp灢

/tiesofinectionmoldedpolroleneTiOanocomjyppy2n灢灢,():terialsScience&Technolo2012,288686灢692.gy:[]ositesEffectsofsurfacemodificationJ.JournalofMap灢]():进展[安徽农业大学学报,J.2017,444702灢708.,AriculturalBiotechnolo2019,17:189灢195.ggy

采用抑菌圈法可初步验证载菌凝胶的抑菌效

果.取稀释倍数为10-7的大肠杆菌溶液0.1mL涂

/布于固体培养基上,将WPUPVA体积比例为1

培养1暶2的负载RG菌的水凝胶切片放入,2h,其结果如图1由图1在培养条件下,0所示.0可知,/负载RG菌的WPUPVA水凝胶能够在凝胶周围

释放出R并对大肠杆菌的生长起抑制作用,G菌,形成抑菌圈.

[],,8BardhanSPalK,Roetal.NanoarticlesizedeendentySpp灢

]antibacterialactivitiesinnaturalminerals[J.Journalof

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7122.

/朱孟臻等:WPUPVA水凝胶载菌与释放抑菌的研究

,:NanoscienceandNanotechnolo2019,19(11)7112灢gy

·115·

[]杨暋棽,孟文静,卢晓静,等.交联聚乙烯醇栓塞微球的制17

733灢738.

[]冉军舰,焦凌霞,梁新红,等.嗜酸乳杆菌产细菌素的提取9

124.

],:备与体外性质[北京大学学报(医学版)J.2014,46(5)

]:及其生物特性研究[食品工业科技,J.2017,38(13)118灢[]A,18rneSJohannaP,FlorianP,etal.Crosslinkinfahgoy灢灢

inantimicrobialsuerabsorberandinterenetrating,ppghy灢,ties[J].ACSAliedMaterials&Interfaces2017,9pp[]魏晓慧,王润泽,林暋松,等.抗菌水性聚氨酯研究进展19

[]20SeliktarD.Desininellcomatiblehdroelsforbioggcpyg灢灢

1124灢1128.

[]():聚氨酯工业,J.2017,3235灢8.():4236573灢36582.

droelnetworkswithlonastinntimicrobialproergglgap灢,drohilicantimicrobialpolcationtowardafastswellpy灢灢

[]李世超,方暋华,朱校适.嗜酸乳杆菌产细菌素的生物学10

[]梁东梅,李玉鹏,杜艳芬,等.三株乳酸杆菌的分离鉴定与11

[]12Zommere橭,NikolaevaV.Immobilizationofbacterialasj灢

[]taminatedlandsJ.EnvironmentalandExerimentalBip灢[]张暋敏,/杨暋鱼.酵母菌发泡P13VALCMC多孔复合材料[]张永栋,汪龙眠,张毅敏,等.聚乙烯醇凝胶包埋固定化细14

():306744灢748.

]():的制备[工程塑料应用,J.2016,441122灢26.olo2017,15:105灢111.gy,

sociationinalinatebeadsforbioremediationofoilcong灢灢]():益生特性研究[中国饲料,J.20181124灢29.]():特性及抑菌机制研究[饲料研究,J.20171120灢26.

,:medicalalications[J].Science2012,336(6085)pp

[]刘暋齐,刘爱红,孙美玲,等.嗜酸乳杆菌胞外多糖提取工21

[]U22hl湭r暒ov昣T,Greorov昣E,PabstW,etal.Prearationofgp

cellularaluminaceramicsviabioloicalfoaminithggweastanditsmicrostructuralcharacterizationviastereoy灢]():艺优化[食品与发酵工业,J.2011,372200灢204.

]菌联合植物的除氮研究[生态与农村环境学报,J.2014,

[]孙肖园,张宝善,刘莎莎,等.柿单宁凝胶固定啤酒酵母菌15

141.

]:发酵工艺研究[食品工业科技,J.2015,36(12)137灢[]loicalrelationsJ.JournaloftheEuroeanCeramicSogp灢[]陈士龙,胡图强,胡孝丽.聚乙烯醇水凝胶的性能研究23

[]():临床口腔医学杂志,J.2013,2994灢7.,():ciet201535187灢196.y

[]陈暋诚,郭俊元,周明杰,等.壳聚糖海藻酸钠固定化菌16灢

2812灢2821.

]:小球处理猪场沼液[中国环境科学,J.2019,39(7)

暰责任编辑:蒋亚儒暱

崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊崊(上接第95页)

,,,暋暋[15]JosehRSamaniukCTimScottThatcherWRootetp

,al.Theinfluenceofpolmeradsortionandfibercomyp灢,,[]encottonandcornstoverpulsJ.BiomassandBioenp灢[]刘雷艮,沈忠安,林振峰.氨基聚合物共混改性聚乳酸超16

20灢25.

,er2017,103:47灢54.gy

,ositionontherheolofaueoussusensionsofaspgyoqpp灢

[]彭新文.功能化半纤维素高效合成及其材料应用研究19

[]Q,,,20iuLieweiShenYidinWanhenetal.ScanninggCge灢

lectronmicrosconalsisofguarguminthedissolupyay灢,[]tionelationandgelbreakinrocessJ.PolmerTesggpy灢灢,tin2018,68:95灢99.g

[广州:华南理工大学,D].2012.

]:细纤维膜的制备及染料吸附性能[丝绸,J.2019,56(5)[,,21]ElenaMIvanKovaIrinaPDobrovolskaaPavelVy

[]蔡亚云,赵佳玥,李文锋,等.不同粒径塑料微颗粒在斑马17

]鱼腮组织中的积累及其对蒽毒性的影响[应用与环境J.():生物学报,2017,2361154灢1158.

[]orousstructureformationofchitosansonesJ.Polppg灢[]蒋昌松.医用硬性内窥镜光学性能质量控制检测技术研22

究[深圳:南方医科大学,D].2013.,merTestin2016,52:41灢45.yg

,Poradukhinetal.InsitucroSEMinvestiationofpyyg灢灢

[]孔暋勇,张嘉月,沈晓冬.气凝胶用于室内空气污染物去18

]():除研究进展[功能材料,J.2019,5055054灢5063.

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