世界中医药2007年11月第2卷第6期367丹红注射液对实验动物抗凝抑栓作用的研究付樱‘何娟‘卢露‘(，陕西步长集团科研部，西安市高新路50号，710075)摘要目的:探讨丹红注射液治疗心脑血管疾病的作用机制。方法:以血小板最大聚集率、环状动静脉血检湿重、血检形成抑制率、血液流变学等为指标，观察其杭凝抑检的作用。结果:丹红注射液各剂量组均可显著降低家兔血小板聚集率，改善急性血瘫模型大鼠血液流变学，抑制家兔血检形成，减轻血检湿重等作用。结论:丹红注射液具有显著的抗凝抑检作用。关键词丹红注射液/药理学StudyonAnticoagulationofDanhongInjectiononLabAnimalFuYing,HeJuan,LuLu(R&DofShanxiBuchangGroup,Van710075)AbstractObjectives:toinvestigatetheactionmechanismofDanhongInjectiononcardio-cerebral-vasculardisease.Method:Anticoag-ulationeffectoftheInjectionwasinvestigatedusingparameterssuchasmaximumplateletaggregationrate,wetweightofthrombus,inh-ibitiverateofcerebralthrombosis,andhemorheologicalparameters,etc.Results:DanhongInjectionatalldosesstudiedcouldsignifi-cantlyreduceratesofplateletaggregationinrabbits,improvehemorheologyofratsofacutebloodstasis,andinhibitcerebralthrombosis，andlowerwetweightofthrombus.Conclusion:DanhongInjectionhasmarkedanticoagulativeeffect.KeyWordsDanhongInjection/Pharmacology丹红注射液是根据中医药理论及多年临床经验，通过大量实验研究研制开发的复方注射液，由丹参及红花两味药材组成。其中丹参味苦性微寒，为主药;红花味辛性温，为辅药。二药皆人心、肝经，相辅祛痕生新，除邪而不伤正。丹红注射液能滋补肝肾、活血祛公司提供，为淡红棕色的澄明液体，批号:2006041501.2剂量设计:以临床人日用量为基础，人按70kg计算，实验用剂量按动物与人公斤体重换算〔‘J，中等剂量约相当于人临床等效剂量，再按1/2和2倍临床剂量各设一个剂量组。即大鼠分别注射丹红注射液小剂量(3.6g生药/kg)、中剂量(7.2g生药/kg)、大剂量癖、安神宁心，临床上主要用于治疗痕血闭阻所致的冠心病、心绞痛、心肌梗塞，痕血型肺心病，缺血性脑病、(14.4g生药/kg)，家兔分别注射丹红注射液小剂量脑血栓等病症。本实验就丹红注射液对实验动物抗凝(1.85g生药/kg)、中剂量(3.7g生药/kg)、大剂量抑栓作用进行初步研究。(7.4g生药/kg)。1实验材料1.3阳性对照药:维脑路通注射液，动物给药剂量按1.1受试药物:倍通丹红注射液由济南步长制药有限动物与人公斤体重换算〔‘」，大鼠临床等效剂量为现上述肾虚外在表现。孕激素LNG模型、癸息汤模型变形能力减弱。结果提示，孕激素LNG模型、癸息汤模均表现为排卵抑制、孕激素降低。可见，癸息汤模型符型符合血癖证的病理生理改变。合肾虚外在表现及生育力降低，孕激素LNG模型无肾综上所述，孕激素及癸息汤所致排卵抑制动物模型虚外在表现，但有生育力降低的本质表现。可初步用于补肾活血促排卵方药的药效研究及疗效判血痕证动物模型的判定包括血痕证的相关脉证的定。重现，如舌质青紫、疲斑、出血等，且能反映引起血疲证参考文献刘敏如，李春梅.养精汤促卵泡发育的临床观察.中国中西医结的病因病机，如寒邪、郁怒、气虚、血热、创伤等，同时还1陆华，合杂志，1998,18(4):217一220应具备血疲证所共有的病理生理改变，如血流变学异2胡心伟.卵泡发育及排卵障碍的肾虚血癖动物模型研究.成都中医药常、微循环障碍等。本实验结果显示，LNG组、癸息汤大学硕士学位论文集，2003.组全血勃度值、纤维蛋白原、全血高切相对赫度值升高，3李仪奎.中药药理学实验法学.上海科学技术出版社，1991:226.与正常组比较有显著性差异(P<0.05)。此外，LNG组4彭成.氢化可的松阳虚动物模型的反思.中国中医基础医学杂志，1998,4(2):55一57.全血高切还原勃度升高、红细胞变形指TK值降低，(2007一07一18收稿)与正常组比较有显著性差异(P<0.05)，表示其红细胞368WORLDCHINESEMEDICINENov.2007,Vol.2,No.6表I各实验组对家兔血小板聚集性的作用组别剂量PA盯m。%PAgV_%(9生药/kg)给药前给药后给药前给药后空白对照组0123.38160.28130.45士59.4727.25士9.8325.67士8.46维脑通路组0.02138.12士60.33266.51180.25028.41士10.088.52士5.21△丹红大剂量组7.4134.62士71.54284.50175.62030.47士5.116.54士3.250丹红中剂量组3.7128.67士60.65245.49士69.58029.0615.368.6314.15\"丹红小剂量组1.85136.68170.36198.67士74.43`28.55+5.1412.3915.18注:各给药组前后比较:`P<0.05，0P<0.01;与空白对照组比较:'P<0.05,0P<0.010表3各给药组对急性血痕模型大鼠血液戮度影响的研究实验参数空白对照组模型组维脑路通组丹红大剂量组丹红中剂量组丹红小剂量组高切变率a度(mps.S)4.771D.448.5910.744.8110.4204.9210.4306.11士0.496.5510.57低切变率9度(mps.S)3.4910.275.39士0.483.40+0.20.3.33士0.24*4.1710.244.09士0.44血浆勃度(mps.S)10.0011.0219.90士2.6410.88士1.25`9.90士1.68*13.7612.66.13.86士2.40\"血沉(mm/h)7.3515.2610.8914.607.6416.067.2512.69'8.13士3.77*9.11士2.03红细胞压积(%)38.2212.2839.80士3.5238.912.3437.9士3.6039.01)士3.5239.53士3.62纤维蛋白原含量(岁1)2.3110.695.44士9.(刃2.43士0.6202.27t0.6503.05士0.7603.0110.680血小板总数(万/HIM2)17.64t2.2729.2312.5817.87士2.09017.70士2.科△20.8212.6921.22士3.17.血小板薪附率(%)27.5413.6547.64土3.8229.04士3.41△27.88士4.3633.47土4.08034.5614.91△全血还原戮度(%)12.48士1.4021.5811.4012.3711.76.12.98t1.64'15.67士2.1116.57士2.78血液相对猫度(%)0.48士0.100.43+0.120.4410.120.50:0.15'0.44士0.100.47士0.09注:与模型组比较，'P<0.05,0P<0.0100.04g/kg，家兔临床等效剂量为0.02g/kgo最大聚集程度。测定给药前血小板聚集性，正常值后1.4试剂:构椽酸钠，由湖南华日制药有限公司提供，臀部肌肉注射给药18天，与末次给药40min后按以上批号:20050623;ADP试剂，由上海耕奔生物技术有限方法测给药后各组血小板聚集性。结果见表1。由表公司提供，批号:20060118;肾上腺素，由上海西唐生物1的结果显示，各给药组均能显著延长家兔血小板的科技有限公司提供，批号:20060205;戊巴比妥钠，由上最大聚集时间(PAgT_%)，明显降低家兔血小板的最海西唐生物科技有限公司提供，批号:20050621;肝素，大聚集率(PAgVm_%)。且丹红注射液中剂量组与维由河北常山生化药业股份有限公司提供，批号:脑路通组作用相当，而丹红注射液大剂量组的疗效优20051115。于维脑路通组。1.5动物:Wistar大鼠，体重190一21摊，雌雄各半;新表2各给药组对家兔血栓形成的影响西兰家兔，体重1.2一1.8kg，雌雄各半，均由西安医科组别剂量(9生药/kg)血栓湿重(rng)抑制率(%)大学动物中心提供。空白对照组043.63士8.641.6仪器:LG-llI型旋转筒式血液勃度测定仪，由上海维脑路通组0.0230.17士7.1230.8尼润智能科技有限公司提供。丹红大剂量组7.422.24士6.6749.0'丹红中剂量组3.724.52士6.782实验方法与结果43.8\"丹红小剂量组1.8533.83t7.0122.52.1对家兔血小板聚集性的作用〔2,3]:取健康的新西注:与维脑路通组比较，'P<0.050兰家兔30只，实验室喂养5天后随机分为5组，每组62.2对家兔环状静脉血栓形成的作用[31:取30只健只。分别为丹红注射液大剂量组、中剂量组、小剂量康家兔，分组情况同上，对照组和给药组动物体重严格组、阳性对照组、空白对照组。各给药组每天臀部肌肉配对，动物臀部肌肉注射给药，连续2周，于末次给药注射给药，1次/d，连续给药5天，空白组给予等量生半小时后，以0.1ml/kg(2.5%戊巴比妥钠)耳缘静脉理盐水。实验前12h禁食不禁水，在无菌条件下心脏注射麻醉，仰卧固定，分离右颈总动脉及左颈外静脉，取血5ml，加人含3.8%拘椽酸钠抗凝剂的试管中(比用聚乙烯插管(在三段管中放人一根locm的4号手例1:9)轻轻摇匀，在600转离心10min吸取上清液备术线)充满50U/kg肝素生理盐水并夹住管壁，将管的用，并按1:10加人ADP试剂(终浓度为2t,mol/kg)，两端分别插人左颈外静脉和右颈总动脉，术后5min开此为PRP;再以3000转离心l0min，此为PPP，用PPP放血液，开放血流15min后中断血，迅速取出手术线称将预热15min的聚集仪调零，观察PRP在5min内的重，各给药组与生理盐水组进行比较。抑制率(%)=世界中医药2007年11月第2卷第6期(对照组血栓重一给药组血栓重)/对照组血栓重x转前的血小板数x100%。血液的相对豁度是血液豁100%。由表2的结果显示，各给药组能明显减轻家兔度与血液血浆勃度在相同温度、压力条件之比，而用全的血栓湿重，即对家兔血栓形成有显著的抑制作用。血高切变率豁度值代替血液勃度。全血还原勃度系指其中丹红注射液大、中剂量组的效果较佳，抑制率分别全血高切变率勃度值和红细胞压积浓度之比。结果见达到49.0%和43.8%，两者疗效相当，与维脑路通组表3中。由表3的结果显示，与模型组比较，各给药组比较有显著性差异。能显著降低模型大鼠的纤维蛋白原含量、血沉、血小板2.3对大鼠血液流变学的作用〔21:取60只大鼠，分为勃附率，给药前后血液相对勃度的改变表明其主要通6组，每组10只，分别为空白对照组、模型组、维脑路过降低血浆勃度来降低全血赫度，从而显著改善大鼠通组、丹红注射液大剂量组、中剂量组、小剂量组。每血液循环。其中，丹红大剂量组的作用更为显著，比维组动物每天腹腔注射给药1次，连续2周。动物取血脑路通组的疗效稍好。前1天，除空白对照组外其余动物皮下注射肾上腺素3讨论0.08m1/l00g体重，共2次，间隔4h，第1次注射后2h抗凝抑栓作用是中药复方制剂治疗心脑血管疾病将大鼠浸人冰水中5min做急性血察模型，然后所有动的一个重要的作用机制。通过本次实验可以看出，丹物禁食不禁水，次日清晨将大鼠取血，以待检测。各组红注射液具有显著的延长实验动物血小板的最大聚集动物取血时皆不麻醉，剪开颈动脉，使血自然流出，取时间、降低实验动物血小板的最大聚集率、改善实验动血和肝素1:9抗凝。采用LG-III型旋转筒式血液勃度物血液流变学等作用，通过这些机制能直接抑制血栓测定仪记录高切变率、低切变率豁度值(,qb)(切变率的形成，或是对已形成的血栓具有一定的溶解作用，从分别为200/s,400/s)。红细胞压积值(HCT)用高速而发挥了良好的抗凝抑栓的治疗效果。从丹红注射液微量离心法测定。将抗凝全血离心(转速300rpm)大、中、小剂量的疗效结果分析，各给药组均有明显的15min制血浆lml，按上述方法测血浆豁度;用血沉压治疗作用，且具有一定的量效关系，其中中等剂量与大积板测定肝素抗凝血1h血沉值;红细胞压积值剂量的疗效无显著性差异，两者的各项治疗指标均比阳(HCT)用高速微量离心法测定。采用热沉淀法，按下性对照组为优，因此，丹红注射液具有良好的应用价值。列公式计算纤维蛋白原含量(FIR):纤维蛋白原含量参考文献(g/1)=纤维蛋白原长度/血浆长度x100%。采用常1徐叔云主编.药理实验方法学.北京:人民卫生出版社，1994;1535.2陈奇.中药药理实验研究方法学.北京:人民卫生出版社，1996;513一566.规方法进行血小板豁附实验，采用血小板勃附仪转盘，3张均旧.现代药理实验方法.北京:北京医科大学、中国协和医科大按照下式计算血小板勃附率(PAdT):血小板豁附率学联合出版社，1998;1152一1217.(%)=(旋转前的血小板数一旋转后的血小板数)/旋(2007一07一05收稿)“名老中医暨高级药剂师国际论坛”征稿通知由世界中医药学会联合会学术部、世界中医药杂志社联合主办，由“香港注册中医学会”协办的“名老中医暨高级药剂师国际论坛”拟将于2008年2月下旬在中国广东召开。欢迎投稿并参加会议。现征稿如下:1.征文内容:(1)中医基础研究和理论研究;(2)名老中医临床经验总结与继承;(3)临床应用经方、成方、验方的体会;(4)中药理论研究及现代应用;(5)中药及复方制剂的开发与研究;(6)中医临床各科经验介绍及研究进展;(7)中药、方剂理论及现代应用综述;(8)中药的文献整理;(9)中药的实验研究和药理研究;(10)中药的鉴别、保管研究;(11)中药临床药学总结;(12)中药应用的安全性探讨;(13)中药的有效性及临床整理应用;(14)中药新剂型制剂技术;(15)中药有效单体成份研究;(16)针灸及非药物疗法在各科临床中的应用等;(17)中医皮科、妇科、骨科、儿科、眼科等临床经验;(18)中医美容;(19)中医药膳食疗研究;(20)药用植物栽培技术。2.征文要求:(1)论文要求论点明确，论据充分，结构严密，文字精炼，具有科学性、创新性、实用性;(2)文稿中的计量单位均须采用法定计量单位，如“克”应为“g“毫升”应为“ml”等;(3)征文经专家评审后，录用文章刊登在《世界中医药》杂志2008年增刊上，并邀请参加会议，人选论文将安排在大会交流，参加会议者颁发证书并授予国家级继续教育学分;(4)征文截止日期为2008年1月上旬;(5)文题下署作者姓名，文稿末尾写清楚作者单位名称、地址、邮政编码、电话;请在投稿信封左下角注明“会议”字样;(6)欢迎电子邮件投稿。3.投稿地址:北京市朝阳区小营路19号财富嘉园A座302室，邮码:100101，联系人:焰爱晖。E一二1;wfc-ms2006zzs@163.coma