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几种植物在模拟污水处理湿地中根际微生物功能群特征的研究

2023-09-30 来源:步旅网
农业环境科学学报2010,29(4):764—768 Journal of Agro—Environment Science 几种植物在模拟污水处理湿地中根际微生物 功能群特征的研究 江福英 ,一,陈 昕 ,罗安程 (1.浙江大学环境与资源学院,杭州3 10029;2.福建省农业科学院茶叶研究所,福建福安35501 5) 摘要:以美人蕉、香蒲、垂穗莎草、玉带草为材料,研究了在模拟人丁湿地条件下水生植物根际与非根际土壤中的微生物数量、种 群、土壤酶活性特征。结果表明,不同水生植物根际、非根际间的细菌数量无明显差异,而真菌与放线菌的根际与非根际问差异较显 著。根际硝化细菌数和反硝化细菌数最多的水生植物都是香蒲,分别为2.17x10 个・g 干土和6.17xlO 个‘g 干土,有机磷细菌数 最多的是美人蕉为5.68x104个・g t干土,无机磷细菌数最多的是玉带草为3.72 ̄10 个・g 干土。4种不同水生植物的根际土壤脲 酶、磷酸酶、硝酸还原酶、亚硝酸还原酶活性都较非根际土壤高,湿地植物的根际效应显著。 关键词:人工湿地;湿地植物;微生物;土壤酶;根际 中图分类号:X171.5 文献标志码:A 文章编号:1672—2043(2010)04—0764一O5 Investigation on the Microbial Functional Groups Characteristics of Rhizoshphere of Wetland Plants in Mimic Wastewater Treatment JIANG Fu—ying .CHEN Xin .LUO An—cheng (1.College of Environmental and Resource Science,Zhejiang University,Hangzhou 310029,China;2.Tea Research Institute,Fujian Aeade— my of Agriculture Science,Fuzhou 355015,China) Abstract:A mimic experiment was can'ied out to study the microbial quantity,microflora,enzyme activities in the rhizosphere and non—rhi— zosphere of4 species wetland plants(Cannagener ̄,T)pha orientalis,Cyperus nutans,Reineckia carnea).Resuhs showed that the number of fungi and actinomyces in rhizosphere soil of 4 wetland plants was obviously higher than that in non—rhizosphere soil,while no signiicantf dif- ference was observed in bacteria.Typha orientalis possessed the largest number of nitifrying bacteria and denitrifying bacteria in the rhizo— sphere.which were 2.17 ̄10 g-iand 6.17x10 g.resprectively.Canna generalis had the largest number of organic phosphobacteria,which was 5.68x10 g~.Reineckia carnea had the largest number of inorganic phosphobaeteria,which was 3.72x10 g~.The activities of urease, phosphatase,nitrate reductase,and nitrite reductase in rhizosphere soil of 4 wetland plants were higher than those in non—rhizosphere soil. The rhizosphere effect of wetland plants was obvious. Keywords:constructed wetland;wetland plant;microbe;soil enzyme;rhizosphere 人工湿地是近30年发展起来的一种污水处理新 技术。该技术的原理是利用系统中基质+水生植物+ 微生物的物理学、化学、生物学三重协同作用,通过基 解来实现对污水的高效净化I 1。许多研究已表明 , 生长有植物的湿地系统对污染物的去除效果优于无 植物的湿地系统。湿地植物作为人工湿地的重要组成 部分,是湿地发挥作用的关键。植物的根系区域为微 生物的生长提供了必要的营养与能量,有植物的湿地 质过滤、吸附、沉淀、离子交换、植物吸收和微生物分 收稿日期:2009—09—26 系统由于根际效应的存在,其微生数量显著高于无植 物系统f 。湿地植物的一个重要生理特征是其根系的 泌氧作用,这一作用使其根部形成好氧微区,而非根 际在淹水条件下为厌氧或缺氧区。因而,生长有植物 基金项目:国家自然科学基金资助项目(30471039) 作者简介:汀福英(1975一),女,福建建阳人,博士研究生,主要从事植 物营养与环境生态方面的研究。E—mail:jfy98@sina.con 通讯作者:罗安程E—mail:acluo@zju.edu.ca 第29卷第4期 农 业 环 境 科 学 学 报 765 的湿地系统,其微生物的数量、种类及系统内的氧化 还原势与无植物的湿地系统有很大差别,可能正是这 种原因造成了植物在人工湿地处理污水时效率差别, 对于这些问题的研究,有助于我们进一步了解植物在 人工湿地去除污染物中的机理 。I。尽管如此,目前关 于湿地植物根际微生物学特征研究较少,因而研究不 同湿地植物根际化学和生物学特性,对于进一步揭示 人工湿地去除污染物的机理、提高污水处理效率具有 重要意义 1材料与方法 1.1供试材料 1.1.1供试植物 试验选用美人蕉(Cannageneralis)、香蒲(Typha orientalis)、垂穗莎草(Cyperus nutans)、玉带草(Rei— neckia carnea)实生苗作为供试植物。 1.1.2培养基质 用于湿地植物栽培试验的基质为采自浙江大学 华家池校区的小粉土与河砂的混合土。小粉土经风 干、磨细后过0.5 mm筛待用。河砂用清水冲洗干净, 晒干后待用,土砂混合比为1:2。小粉土的理化性质 为:全氮1.69 g・kg~,有机质25.4 g・kg一,全磷0.678 g・ kg~,碱解氮156 mg・kg~,速效磷25.3 mg・kg~,速效钾 56 mg・kg~。 1.2试验处理 在苗高1 5~20 cln时用淹水土壤根袋培养法进行 培养,装置如图1所示 1。称取砂土混合物2 650 g装 入直径20 cm、高17 cm的塑料容器中。图中所示网袋 由300目(40 m)孔径的尼龙绢网制成,根袋长20 cm、宽10 Cln,根袋中装入850 g基质。淹水漫过土表 2~3 CIII。根袋内的土壤视为根际土(R),根袋外的土 壤视为非根际土(NR),每盆一株,重复3次,经过30 d培养后采样。 1-3测定方法 1.3.1微生物数量的测定 细菌、真菌、放线菌、有机磷细菌、无机磷细菌采 用稀释平板法,硝化细菌、反硝化细菌的测定采用最 大或然计数法(MPN)[12l。 1.3.2土壤酶活性测定 硝酸还原酶、亚硝酸还原酶、磷酸酶的测定参照 相关文献[131,脲酶的测定参照文献[14]。 1-4数据处理 所有试验结果都以烘干后土重为基础计算(105 植株plant 根际rhizosphere 非根际non—rhizosphere 网袋netbag 图1模拟人工湿地根袋培养 Figure 1 Cultivation of wetland plants in net bag filled with the mixture of soil and sands ℃,24 h),用DPS数据处理系统进行统计分析。 2结果与分析 2.1不同湿地植物根际与非根际微生物数量变化 2.1.1根际与非根际微生物区系变化 试验结果表明,所有湿地植物其根际与非根际的 微生物数量特征呈现出明显的差异。表1为不同湿地 植物根际微生物总数的变化。从表中可见,不同湿地 植物根际与菲根际微生物数量之问差异很大。从微 生物数量上来看,细菌>真菌>放线菌;在总体上,植 物根际的微生物数量均显著大于非根际,这与前人 的研究[1O,1 结果相同。本研究还表明,基质中细菌数量 较大的湿地植物为美人蕉和垂穗莎草,而真菌和放线 菌数量较多的分别为是美人蕉和玉带草。通过方差分 析发现,不同湿地植物根际与非根际问的细菌数量未 达到统计显著差异水平;真菌与放线菌在根际与非根 际问的差异大多达显著水平。不同湿地植物R/NR的 比值细菌为0.82~1.07,真菌为1.40~2.58,放线菌为 1.66~6.92。试验结果表明,本试验采用的湿地植物,其 根系对细菌生长的促进作用不明显,但对真菌和放线 菌具有明显的促进效应,美人蕉对真菌的促进作用最 显著,而玉带草对放线菌的正效应最大。 2.1.2根际与非根际微生物生理类群变化 微生物生理类群的差异与污水处理中的污染去 除有直接的关系。由表1可知,4种植物的根际反硝 化细菌数和有机磷细菌数都远大于非限际,统计差异 达显著水平。垂穗莎草与香蒲根际的硝化细菌数显著 高于非根际,但玉带草与美人蕉则差异不显著。无机 磷细菌数在4种植物的根际与非根际问的差异不大。 4种湿地植物中硝化细菌和反硝化细菌数量最多的 766 江福英等:几种植物在模拟污水处理湿地中根际微生物功能群特征的研究 2010年4月 是香蒲,分别为2.17x102,6.17xl0 个・g 干土;有机 磷细菌数最多的是美人蕉为5.68x10 个・g 干土,而 无明显差异。 无机磷细菌数最多的是玉带草为3.72x10。个・g。干 3讨论 污水处理中,有机物的降解主要依赖于微生物的 作用。人工湿地处理污水时,植物在其中起到了重要 的作用。李寒娥等【5】研究发现,有植物的处理比无植 物的处理其COD叭TP、TN及NHg—N的去除率高。研 究表明,植物在人工湿地中的直接吸收作用所占的比 例并不是很高,在正常情况下,植物体中N元素含量 为0.3%~l%,P元素为0~0.3%I 61。湿地植物对氮的吸 土。植物根系将氧气输送到根区,在植物根区周围的 微环境中依次出现好氧区、兼氧区和厌氧区,氨在好 氧区则被硝化细菌硝化,有机磷细菌将有机磷化合物 转变为简单的磷化物(主要是磷酸盐),使磷酸钙等可 溶解性差的磷化合物溶解。正是由于根际泌氧作用形 成富氧一缺氧的氧化还原微环境,造成湿地植物根际 微生物分布的不同,本研究结果与凌云等 的研究结 果相似。湿地植物根际与非根际微生物生理类群彤 收量为0.03~0.3 g・m_2.d~,且在衰老和死亡期植物没 有除氮效果,通过收割植物对生活污水中氮的去除 率<20%E ,沼生植物的干物质生物量中磷的含量为 0.15%~1.05%,通常湿地植物吸收的磷小于城市污水 NR比值由高到低依次为:有机磷细菌3.77、反硝化细 菌3.08、无机磷细菌1.26、硝化细菌1.21。4种湿地植 物中垂穗莎草的反硝化细菌和有机磷细菌的R/NR 比值最高,根际效应最显著。 2.2不同湿地植物根际酶活性变化 土壤直接参与了土壤中有机物质的转化。由图2 可知,4种不同湿地植物的根际土壤脲酶、磷酸酶、硝 负荷的5%t堋。因此,人工湿地中污染物的去除仍是以 微生物及微生物与介质互作为主。植物根系的引入, 可以明显提高人工湿地的微生物数量,改变微生物生 理类群。凌云[15J的研究表明,芦苇根际的硝化细菌、亚 硝化细菌等好氧细菌数量明显高于非根际。根际对微 生物的促生作用使得根际中的各种微生物数量均明 显高于非根际。因此,人工湿地植物根际效应在污染 物去除中应具有重要作用。 酸还原酶、亚硝酸还原酶活性都较非根际高。4种植 物中玉带草的根际与非根际的脲酶活性最高,分别为 0.211、0.206 mg NH3一N・g ・24h~,但4种植物的根际 与非根际脲酶活性无明显差异。磷酸酶活性也以玉带 草的为最高,根际与非根际的磷酸酶活性分别为 2.780、2.017 mg酚-g ・24h一,且4种植物的根际与非 根际磷酸酶活性差异均达显著水平(P<O.05)。硝酸还 原酶的根际与非根际酶活性也以玉带草为最高,分别 为0.691、0.44 5 mg NO3一N・g ・24h~,同时4种植物的 根际与非根际硝酸还原酶活性差异均达显著水平 (P<0.05)。垂穗莎草的亚硝酸还原酶活性最高,根际 与非根际酶活性分别为1.626、0.624 mg NO 一N・g ・ 本研究表明,从总体上看,对于常用于人工湿地 污水处理的4种湿地植物根际微生物数量根际比非 根际多。尽管细菌总数上,在非根际与根际间差异不 明显,但从生理类群上看,根际明显比非根际高。由于 微生物的数量与营养物质和有机物的含量呈正相关, 而湿地植物的根系分泌物为微生物的生长提供了大 量的碳源,而根际的根系分泌物远较非根际多,这可 能是造成根际与非根际微生物数量和类群差异的原 因。本研究中植物根际的反硝化细菌、有机磷细菌数 24h~,但4种植物的根际与非根际亚硝酸还原酶活性 表1不同湿地植物根际与非根际微生物数量变化(个・ 干土) Table l Quantitative difference of microbes in rhizosphere and non-rhizosphere of 4 wetland plants 注:不同字母分别表示O.O5水平差异显著。 辱 .卜 王垦窿垂 T辱 .卜% IJ/ 虫窿 语 第29卷第4期 农 业 环 境 科 学 学 报 O O 0 O O O 0 0 O 767 O ∞加∞∞∞如加m∞ 0.3 工 工 O-2 i嚣 O.1 0 譬 0 0 垂穗莎草 玉带草 美人蕉 香蒲 垂穗莎草 玉带草 美人蕉 香蒲 辱 -卜 ∞Ⅲ/ 睡龉甾醛 辱 .f. Ⅲ/ 蜒龌 普 2 1 O 1 l 1 1 O O O 0 5 2 5 1 5 O 2 8 6 4 2 1 8 6 4 2 都显著高于非根际,说明植物根际进行反硝化作用和 累是由于微生物、动物和根系生命活动的结果,且基质 磷素利用率都较非根际高。因此,人工湿地中,有机物 酶活性与基质中的微生物数量、有机物质含量等呈正 的降解、脱氮、磷化合物的转化等仍主要依赖于微生 相关f2l1,这也就可能导致本研究中植物根际与非根际 物活动,而湿地植物的根际效应大大增加了湿地系统 酶活性的变化规律。另将有机磷细菌、无机磷细菌与磷 中的微生物的作用效率。 酸酶作相关性分析发现,无机磷细菌与磷酸酶之间达 酶是一种生物催化剂,它能直接加速基质中有机 极显著相关(r=0.88,n=8)。说明在湿地植物的根际效 物质的生化转化。脲酶是一种酰胺酶,能酶促有机质 应下,加速了介质中磷的转化效率。 分子中肽键的水解,是催化尿素水解的唯一酶,因而 综上所述,生长在湿地介质中的湿地植物,其根 也是土壤中氮素转化的关键酶,主要来源于微生物和 际微生物、酶活性及一些元素的有效性与非根际存在 植物(包括活体分泌和死亡残体分解释放)。磷酸酶能 较大差异,不同种类的湿地植物其根际效应不同。根 催化土壤中磷酸单酯和磷酸二酯水解,将有机磷化物 际效应的存在是人工湿地中植物系统提高污水处理 水解形成相应的无机磷与有机物。硝酸还原酶是反硝 效率的一个重要原因。 化作用过程中的重要酶类,作为专性酶参与土壤硝态 氮的进一步还原,在嫌气条件下催化硝酸盐为亚硝酸 参考文献: 盐_13J。亚硝酸还原酶为嫌气条件下催化反硝化过程的 [1]Cristina S C C,Anouk F D,Alexandra M,et a1.Substrate effect on bac— NO:转化为N 0的酶。磷酸酶、脲酶、硝酸还原酶、亚硝 terial communities from constructed wetlands planted with Typha latifo— 酸还原酶在物质转化过程中都起着非常重要的作用。 lia treating industiral wastewater[J].Ecological Engineering,2009,35: 在吴振斌等【 嘲的研究中,人工湿地植物根区脲酶的活 744-753. [2】Dennis K,Thaminarat K,Hans B.Treatment of domestic wastewater in 性与总氮的去除率有较明显的相关关系。本试验中所 tropical,subsurface flow constructed wetlands plnated with Canna and 有植物的根际磷酸酶、脲酶、硝酸还原酶、亚硝酸还原 Heliconia[J].Ecological Engineering,2009,35:248—257. 酶和活性都高于非根际,且根际与非根际的磷酸酶、硝 [3]Sindilariu P D,Woher C,Reiter R.Constructed wetlnads as a treatment 酸还原酶潘I生差异达显著水平。基质酶在基质中的积 method for eflfuents from intensive trout farms[J1.Aquacuhure,2008, 768 277:179-184. 江福英等:几种植物在模拟污水处理湿地中根际微生物功能群特征的研究 京:科学出版社,1985. 2010年4月 [4]卢少勇,张彭义,余刚.人T湿地沸石填充方式研究l J1.环境科学研 Microbial Room of Institute of Soil CAS.Research methods on soil mi— 究,2006,19(3):91—95. LU Shao—yong,ZHANG Peng—yi,YU Gang.Research of zeolite filled crobial[M].Beijing:Science Press,1985. [13]关松荫,张德生,张志明.土壤酶及其研究法【M].北京:农业出版社, 1986. GUAN Song—yin,ZHANG De—sheng,ZHANG Zhi—ming.Soft enzyme modes in constructed wetland[J].Research ofEnvironmental Sciences, 2006,19(3):9l一95. 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